昆虫触角电位仪GC-EAD操作流程

2021-08-22  来自: 唐山定感科技有限公司 浏览次数:262

昆虫触角电位仪GC-EAD操作流程

一、准备实验材料

(1)状态良好的昆虫;(2)根据实验目的,准备待刺激物质;(3)吸附刺激物的滤纸;(4)放置刺激物的巴氏德玻璃管或者蓝色枪头;(5)生理盐水;(6)酒精灯等其他实验材料。

设备组成部分:IDAC-2信号采集控制器一台;CS-55刺激气流发生器一台;MP-15显微操作器一套,含一对微操、底板和味管固定器;combi Probe探头一个;EC气相物质加热系统,屏蔽柜一个;工具盒:一把手术刀、两把镊子、一把剪刀、切管用陶瓷片、保存银丝且内含乙醇的小瓶等。


二、测量流程

(1)打开GC,选好方法至等待进样运行;

(2)打开EC气相物质加热系统为加热管加热;

(3)查看洗气瓶中纯水的液位是否为一半,不足补充;打开CS-55刺激气流发生器电源;

(4)检查软件连接,打开电脑上GCead,IDAC-2信号采集控制器的左上角的指示灯即可打开,如果不亮,可以尝试重启软件或者拔插一下IDAC-2的USB线再打开软件;

(5)准备昆虫触角,触角的准备方式没有标准模式,可以使用活虫但是需要牢牢固定虫体,避免影响基线的稳定性;也可以剪单只触角,带头的触角或其他形式,具体采用哪种形式,以基线稳定为准。

搭触角方式分两种:一种为导电胶连接方式,将导电胶在金属叉上薄薄涂一层,然后将触角的基部(接头部分)搭在参考极,触角的端部(触角远端)搭在测量极(一般为有胶带标记的一头),最后再盖一层导电胶,避免导电胶过快干燥,影响测量;另一种为玻璃电极连接方式,根据触角的两端直径准备直径相当的两根玻璃毛细管,吸入生理盐水,用滤纸擦干毛细管管壁外的生理盐水,管中不能有气泡及其他小杂质,否则需要重新更换生理盐水,管中液面为距离管尾部3mm以上,同时将玻璃电极夹持头中插入银丝,头部超过夹持头3mm,尾部稍微折弯,然后固定到显微操作器上相应的位置。用吸了生理盐水的玻璃毛细管尖部轻轻吸住触角的基部,从玻璃毛细管尾部插入参考极一端的玻璃电极夹持头,测量极插入另一根吸入了生理盐水的玻璃毛细管,控制微操使测量极一端玻璃毛细管的尖部和触角尖部连接。为了得到信噪比良好的信号,尽可能多的暴露感器,且不能夹伤、冷冻或者破坏感器,可在实验前做电镜了解触角感器分布。

(6)关闭屏蔽柜,点击GCead软件的record显示实时谱图,基线稳定后,从GC进样,GCead软件会自动进入记录窗口,会按照设置自动停止记录,或者按record下stop and save;记录完毕后,再次点击record显示实时谱图,搭第二根触角,开始第二个记录。


三、关机

测量完毕后,关闭软件和电脑,将电极叉擦干净,银丝电极浸泡在乙醇中,味管和玻璃电极夹持头要定期超声波清洗,以备后期正常使用。最后关闭刺激气流发生器电源,关闭屏蔽柜,收好工具;按照GC关机流程关闭GC;最后关闭EC气相物质加热系统。


四、注意事项:

(1)安装或者拆卸电极叉或者玻璃电极的测量极一端的夹持头时,务必将手接触屏蔽柜,将身体干扰排除,否则combi探头易遭破坏;

(2)要时常检查接地系统是否连接正常:包括底板和屏蔽柜间连线、主气路和刺激气路上接地线。

(3)基线不好或者对照变大,说明系统有污染,需要清洗和维护,包括更换气体管路,清洗味管、玻璃电极夹持头,并且刺激气流发生器后面的活性炭要定期活化,温度200度烘箱中活化一个小时。


触角电位仪


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